Установите последовательность этапов получения штаммов бактерий, несущих ген животного, с использованием методов генной инженерии. Запишите в таблицу соответствующую последовательность цифр.
1) встраивание фрагмента ДНК в плазмиду
2) образование колоний бактерий с целевым геном
3) введение гибридной плазмиды в прокариотическую клетку
4) выделение нужного фрагмента ДНК из клетки животного
5) отбор животного, содержащего необходимый аллель
Этапы метода рекомбинантных плазмид:
Рестрикция — разрезание молекулы ДНК, например клетки млекопитающего, ферментами-рекстриктазами на фрагменты с одинаковыми липкими концами и нужным геном.
Лигирование — «вшивание» гена с липкими концами в плазмидную ДНК с помощью ферментов-лигаз и получение рекомбинантной плазмиды.
Трансформация — введение рекомбинантной плазмиды в бактериальную клетку.
Скрининг — отбор колоний бактерий, содержащих рекомбинантные плазмиды с нужным геном.
1 — отбор животного, содержащего необходимый аллель;
2 — выделение нужного фрагмента ДНК из клетки животного;
3 — встраивание фрагмента ДНК в плазмиду;
4 — введение гибридной плазмиды в прокариотическую клетку;
5 — образование колоний бактерий с целевым геном.