Установите последовательность образования колоний бактерий методом рекомбинантных плазмид. Запишите в таблицу соответствующую последовательность цифр.
1) разрезание молекулы исходной ДНК на фрагменты
2) внедрение фрагмента ДНК в плазмидную ДНК
3) получение колоний бактерий с рекомбинантной плазмидой
4) введение рекомбинантной плазмиды в клетку бактерии
5) получение рекомбинантной плазмиды
1 — разрезание молекулы исходной ДНК на фрагменты;
2 — внедрение фрагмента ДНК в плазмидную ДНК;
3 — получение рекомбинантной плазмиды;
4 — введение рекомбинантной плазмиды в клетку бактерии;
5 — получение колоний бактерий с рекомбинантной плазмидой.
Этапы метода рекомбинантных плазмид:
Рестрикция — разрезание молекулы ДНК, например клетки млекопитающего, ферментами-рекстриктазами на фрагменты с одинаковыми липкими концами и нужным геном.
Лигирование — «вшивание» гена с липкими концами в плазмидную ДНК с помощью ферментов-лигаз и получение рекомбинантной плазмиды.
Трансформация — введение рекомбинантной плазмиды в бактериальную клетку.
Скрининг — отбор колоний бактерий, содержащих рекомбинантные плазмиды с нужным геном.